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  2. 操作規程

    eppendorf Himac CP100NX超速離心機開頂管管蓋安裝說明

           Himac CP100NX、CP90NX及CP80NX立式超速離心機P100AT2、P90AT/P80AT/P70AT2、P70AT/P50AT2和P45AT角轉頭配套使用開頂管時,按操作指南要求,需為離心管加蓋密封以確保離心樣品安全。與Beckman open-top開口管用的管蓋組件(Cap Assembly)比,Himac品牌開頂管用的管蓋(cap),從結構設計、工作原理、配套工具的使用方法,都有異曲同工之妙(詳情可參考《Open-top開口超速離心管的選擇及使用方法說明》)。此外,Himac也是按工作容量不同,將常用開頂管分成5.0 - 100mL中容量管和4mL以內微量管兩類。而這兩類離心管密封蓋安裝操作流程是不同的。茲根據eppendorf官方資料分別予以說明。

     

    一、5mL及以上標準離心管管蓋的安裝

           Himac品牌中等工作容量開頂管包括了5mL、6.5mL、12mL、40mL、94mL共5種規格,管徑介于13 - 38mm之間,共同之處是管蓋組件中的閥桿直徑一致,適用的壓帽六角螺母及螺母扳手、位于閥桿正中內壁帶螺紋的物料與氣體進出通道、控制通道啟閉用的定位螺釘(setscrew)和裝卸定位螺釘用的工具自然是通用的。

           不同容量開頂管配套的管帽直徑大小不一,而管帽安裝時須使用固定管帽的鉗臺(Tube Vise)。Himac可提供Tube Vise F、Tube Vise E、Tube Vise C和Tube Vise B四種型號的鉗臺,分別對應于94mL、40mL、12mL和5mL/6.5mL開頂管蓋。鉗臺屬轉頭可選組件,須與相應規格的管帽配套使用(詳情參考:CP100NX超速離心機開頂管蓋安裝工具 )。

     

    ● 物料與工具準備

           1.1 準備好離心管、管蓋組件、管蓋螺絲刀B(Tube setter B,作用相當于Beckman離心機提供的Removal Tools)、管蓋擰緊工具(扭力扳手Torque wrench,或套筒扳手Box wrench);

           1.2 轉動手柄(B)將離心管鉗臺固定在實驗臺邊緣上,并松開手柄A。

    圖1 eppendorf Himac CP100NX超速離心機5mL以上開頂管管蓋的安裝工具.jpg

    ● 組裝管蓋

           1.3 將管蓋松散地組裝起來,用管蓋設定器細長的六角扳手(hex wrench)端擰下定位螺釘(setscrew),打開樣品填充和排氣通道;

           1.4 將注射器經管蓋組件正中的通道裝填樣品,樣品填充至離心管容量的四分之三;

           1.5 將管蓋閥桿插入管中后下壓管蓋,直到離心管壁頂端與管帽形成良好接觸;

           1.6 手動擰緊管蓋六角螺母。

    圖2 CP100NX超速離心機開頂管的管蓋安裝和充填流程.jpg

    ● 擰緊管蓋

           1.7 將離心管和管蓋插入離心管鉗臺(tube vice)固定孔中。調整管的位置,確保管帽的頂部和鉗臺臺面平齊;

           1.8 擰緊離心管鉗臺的手柄A以固定離心管和管蓋。當使用的是帶制動器(stopper)的管鉗時,注意轉動管蓋使管蓋閥桿頂部的狹縫,將制動器引入閥桿狹縫中。這樣可確保擰緊管蓋螺母時,離心管和閥桿不隨之轉動;

           1.9 根據制不同管蓋組件指定的擰緊設計要求,用扭力扳手、六角扳手或套筒扳手擰緊管蓋上的螺母(使用帶制動器的管鉗時,六角扳手轉動螺母更方便);

    不同規格離心管管帽螺釘工作扭矩參考表

    管蓋貨號

    管蓋型號

    適用的離心管

    擰緊螺母扭矩值

    5720411225

    F2-AL Cap

    94mL tube: 94PP, 94PC and 94SS Tube

    8 N?m

    5720411212

    E3-AL Cap

    40mL tube: 40PP,40PE,40PET Tube

    6 N?m

    5720411223

    E4-AL Cap

    40PE tube:   used only for a 40PE tube

    6 N?m

    5720411211

    C-TI Cap

    12 mL tube: 12PP,12PC,12PE,12Tia,12SS   Tube

    10 N?m

    -

    B2-TI Cap

    6.5 mL tube

    10 N?m

    5720411202

    B-TI Cap

    6.5 mL tube 6.5PP Tube,6.5PC Tube

    -

    備注:1 N?m = 10.2kgf?cm

           1.10 松開管鉗的手柄A,用管蓋螺絲刀的帶螺紋較粗的一頭擰入閥桿中心孔后取下離心管;

    圖3 CP100NX超速離心機開頂管配平和管蓋密封.jpg

    ● 離心管樣品重量的配平

           1.11 用注射器從管蓋樣品通道進一步填充樣品;

           1.12 將對稱布置的任意兩根離心管的總重量差值控制在0.3g以內;

           1.13 用管蓋螺絲刀細端扳手牢固地擰緊固定螺釘,封閉閥桿通道,以防止樣品和氣體泄漏。

     

    二、4mL及以下離心管的管蓋安裝

           Himac的微量開頂管,即工作容量4mL的4PP Tube、3mL的3PP Tube,適用于P90AT、P80AT和P70AT2三款角轉頭,配套管蓋為A3-AL Cap。

           5mL及以上的常量離心管管蓋中心設有樣品通道,因此樣品裝填過程經歷的是預裝3/4體積樣品→安裝管蓋→繼續填充樣品精確配平→管蓋密封共四個步驟。

           3-4mL開頂管管徑僅11mm,不具有標準閥桿定位螺釘安裝條件。因此,微量開頂管管蓋無液體通道,管蓋安裝不再需要裝卸定位螺釘的操作。離心管樣品裝填、管重量配平操作,必須在管蓋安裝前完成。微量管樣品的裝填過程簡化為裝樣→稱重配平→管蓋安裝三個步驟。

    圖4 CP100NX超速離心機中等容量與小容量開頂管管蓋結構對比.jpg

    ● 物料與工具準備

           2.1 準備好離心管、配套管蓋組件、離心管鉗臺、套筒扳手;

           2.2 轉動手柄(B)將離心管鉗臺固定在實驗臺邊緣上,并松開手柄A。

     圖5 Himac CP100NX超速離心機3-4mL開頂管管蓋裝工具.jpg

    ● 離心管填充樣品

           2.3 用樣品裝填離心管直至弧形液面中心距離管頂部5mm高度;

     

    ● 組裝管蓋

           2.4 將管蓋底部朝上,旋轉管帽,使閥桿和管帽的標記線對齊后并用手擰緊螺母;

     

    ● 離心管重量配平

           2.5 將離心管、管蓋同時放在天平上,調整液體裝填量,確保對稱排列的任意兩根離心管及樣品總重量誤差在0.3g以內,完成配平操作;

     

    ● 安裝管蓋

           2.6 將管蓋安裝到離心管上,壓下管蓋,直到離心管與管帽接觸;

           2.7 用套筒扳手擰緊管蓋六角螺母;

     

    ● 擰緊管蓋

           2.8 將離心管和管蓋組合體插入管鉗的孔中并固定;

           2.9 用套筒扳手將管蓋螺母擰緊;

           2.10 徒手從管鉗上取下離心管,完成管蓋安裝。

     

    主要參考文獻:

    Rotors, Tubes, Bottles And Caps Instruction Manual for Ultracentrifuge(S99920420)

     

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